病毒DNA/RNA 提取试剂盒(吸附柱法)
【产品名称】
通用名:病毒DNA/RNA 提取试剂盒(吸附柱法)
Name :Virus DNA/RNA Extraction Kit(Adsorption column method)
【产品介绍】
本试剂盒可从多种样本中提取DNA/RNA,包括血清、血浆、全血、组织、拭子、尿液、粪便、疤
液、精液、唾液、环境、饲料等。处理的样本加入裂解液后,混合物移至吸附柱中,然后以通过洗涤、
洗脱即可分离出病毒DNA/RNA。本试剂盒提取的核酸可以用于荧光PCR,Northern Blot,cDNA library
Construction 等实验。
【试剂组成】
名称规格
蛋白酶K 1 支
裂解液30mL
洗涤液1 30mL
洗涤液2 30mL
洗脱液5mL
吸附柱50 个
使用说明书1 份
注:洗涤液1 和洗涤液2 已加无水乙醇,可直接使用
【试剂规格】50T/盒。
【储存运输】
室温保存,有效期12 个月,可室温下运输。
【自备材料和仪器】
灭菌1.5mL 离心管、各种规格灭菌枪头、离心机( 转速≥12000rpm)、漩涡混合器等。
【检测方法】
一、样本前处理
1.对全血、血浆、血清、腹水、唾液等非粘稠液体样品的病毒,可以直接取200μL 样品进行核酸提取;
2.对于动物、植物组织样品,加入适量的生理盐水或PBS,充分研磨,震荡混匀,12000rpm 离心5min,
取200μL 上清进行核酸提取;
3.对于拭子样品中的病毒,在拭子样品中加入适量的生理盐水或PBS(300-500mL),剧烈涡旋振荡1min,
取200μL 样品进行核酸提取;
4.对于粪便中的病毒,在样品中加入适量的生理盐水或PBS,充分震荡混匀,12000rpm 离心5min,取
200μL 上清进行核酸提取;
二、试剂准备
试剂盒室温保存,如保存温度过低,应平衡至室温或者温浴,确保各溶液无盐份析出。未使用完的
蛋白酶K 溶液,建议分装放置4℃保存。
三、样本提取操作
1.在干净的1.5mL 离心管中加入200μL 上述处理好的样品(不足200μL,可以加入PBS 缓冲液或者生理
盐水补足200μL)和20μL 蛋白酶K,然后加入500μL 裂解液,盖上管盖,振荡30sec,室温静置5min;
2.把上述混合物转移到吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质,以免阻塞
吸附膜),12000rpm 离心1min,弃去套管中液体;
3.向吸附柱中加入500μL 洗涤液1,12000rpm 离心1min,弃去套管中液体;
4.向吸附柱中加入500μL 洗涤液2,12000rpm 离心1min,弃去套管中液体;
5.把吸附柱放回套管中,12000rpm 离心1min;
6.把吸附柱转移到新的1.5mL 离心管,加入50μL 洗脱液,12000rpm 离心1min,弃去吸附柱,1.5mL 灭
菌离心管中液体即为提取的核酸溶液。可以直接用于逆转录、PCR、荧光定量PCR 等各种下游实验,如
不立即使用,请保存于-80℃冰箱。
【检测结果的解释】
本试剂盒适用于血清、血浆、全血、组织、拭子、尿液、粪便、疱液、精液、唾液、环境、饲料等
样品。
【注检测方法的局限性】
样品量,液体样品建议200μL,不超过250μL,固体组织样品需要研磨取上清;灵敏度,使用时需
配以高灵敏度的PCR 检测试剂和仪器。
【性能指标】
假病毒提取产物(DNA 和RNA)经高灵敏度的核酸检测试剂确定灵敏度为102 copies/mL,线性范
围为103 -107 copies/mL。
【注意事项】
1.试剂各成分除蛋白酶 K 外,室温保存,避免形成结晶,如形成结晶,平衡至室温或温浴使结晶溶解;
2.提取的核酸立即用于下游实验,如不立即使用,请保存于-80℃冰箱。
【生产企业】
企业名称:上海烜雅生物科技有限公司
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