【产品名称】

通用名称：牛结节性皮肤病（LSDV）检测试剂盒（荧光-PCR法）

Name  ：Lumpy Skin Disease Virus Detection Kit

(Real-Time PCR Method)

【包装规格】50T/盒

【预期用途】

本试剂盒适用于检测牛鼻腔液、鼻腔拭子、皮肤、肺、*、淋巴结、肌肉等组织样本或血液中的牛结-节性皮-肤病病毒，用于牛结-节性皮-肤病病毒感染的辅助诊断。

【检验原理】

本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术，设计牛结节性皮肤病病毒的特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光 PCR 技术对牛结节性皮肤病病毒核酸进行体外扩增检测，用于对可疑感染者的病原学诊断。

【储存条件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。

【适用仪器】

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

【标本采集】

采牛鼻腔液、鼻腔拭子、病死或扑杀牛，无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品；或用无菌注射器抽取血液 3~5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管。

【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

【使用方法】

1. 样品处理（样本处理区）

1.1 样本前处理

组织样品：每份组织分别从 3 个不同的位置称取样品约 1g，手术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL灭菌离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；血液直接取 100μL 提取。

1.2 DNA 提取

推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的 DNA 提取试剂盒（离心柱提取

法），请按照试剂盒说明书进行操作。

【注意事项】

所有操作严格按照说明书进行；

试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；

反应液应避光保存；

反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。