牛乙酰乙酸(acac)ELISA检测试剂盒实验原理：

试剂盒采用夹心酶免法，采用了两种高特异性抗体，TMB作为着色剂，最终溶液所显示的颜色强度与样品中指标的量成正比

检测范围：参考说明书

使用前，所有样品应平衡至室温，大约30min，然后充分混匀，确保试剂质量无变化，标准曲线和样品检测同时进行

牛乙酰乙酸(acac)ELISA检测试剂盒操作步骤：
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

牛乙酰乙酸(acac)ELISA检测试剂盒自备物品：
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱

牛乙酰乙酸(acac)ELISA检测试剂盒特别注意：

1. 样品采集后应立即检测，如需贮存的，则应放置在冰冻条件下，避免反复冻融，检测前应在低温下将其溶解并完全混合

2. 如有需要，样品可用EIA缓冲液稀释

3. 建议试验样品和标准品做双份检测

4. 试验样品应在中性PH范围内，有机溶剂的污染会影响试验

5. 只能使用试剂盒内提供的洗涤液洗板，洗板不充足可能会导致试验失败

6. 彻底倒去洗涤液，吸水纸上拍干，不能用吸水纸擦拭微孔

7. 底物液应避光保存，因其对光敏感，且要避免接触金属

8. 加入终止液后30min内读数

本产品仅用于科研，不能用于临床

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