牛磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(P-AMPK)ELISA检测试剂盒详细信息：

产品质量保证，提供全程技术指导。

产品优势:
采用全进口原料和抗体：高效、灵敏、特异，严格引进国际技术标准进行批量生产。
先进的优化方案：稳定的重复性和可靠性。
提供免费代测服务（为客户提供来样检测服务，*限度实验结果的有效性）

ELISA试剂盒需自备的设备及试剂：
1.450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3.Eppendorf 移液器.
4.蒸馏水或去离子水.
5.脱脂棉吸水纸.
6.37℃恒温箱.
7.100ml和1000ml量筒.
8.准备若干个标准品稀释管.

牛磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(P-AMPK)ELISA检测试剂盒检测原理：
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被样本抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

应该做哪些准备呢？

1. 洗涤缓冲液制备：先将洗涤浓缩液平衡至室温，充分混匀，然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀，即得。配制的洗涤液应保存于冰箱内，并于2周内用完

2. 标记抗体的制备：用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍，即得。

例：如果只测一条板，8孔，则需要标记抗体800ul（30ul的标记抗体浓缩+870ul的标记抗体稀释液，混匀，使用时每孔加100ul）

此步骤在实验前完成

剩余的标记抗体浓缩应装于密封瓶内，保存在4℃

3. 标准品的制备：吸取0.5ml的去离子水至标准品瓶内，充分混匀，得到140ng/ml的人COX-2标准品

4. 标准品的稀释：准备8个试管用于标准品的稀释，每管加入230ul的EIA缓冲液

每管的浓度如下

1号管 70 ng/ml

2号管 35ng/ml

3号管 17.5ng/ml

4号管 8.75ng/ml

5号管 4.38ng/ml

6号管 2.19ng/ml

7号管 1.09ng/ml

8号管 0pg/ml（试验样品空白）

吸取230ul的标准品于1号管混匀，然后从1号管吸取230ul加入2号管，依次连续稀释，标准品范围为70~1.09ng/ml

缓冲液稀释

牛磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(P-AMPK)ELISA检测试剂盒性能：
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：*检测浓度小于（参考说明书）
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月

说明书请直接向我司客服索取，详情请以说明书为准。

友情提醒：试剂盒使用完毕后，请妥善处理相关耗材，避免环境污染！

上海烜雅生物是一家致力于全方位满足国内科研及生产所需高端化学产品，集研发、生产、销售、服务于一体的高新技术企业。

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