大鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒的原理：

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。ELISA试剂盒在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体。

ELISA试剂盒样本收集以及处理方法：

液体类标本：
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1）血清：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4）细胞培养上清：
A、检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。
B、检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5）组织标本：
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

【试剂盒特点】

A. 分子量大。合成肽采用化学方法制备，由于工艺的局限，合成数量有限，只能达到数百个氨基酸;而利用基因工程制备的抗原，分子量更大。
B. 稳定性好。人白介素3(IL-3)ELISA试剂盒包被的抗原的稳定性可使试剂盒的效期得到保证，早期以合成肽为包被抗原的试剂盒效期只3-4个月，采用基因工程抗原后效期大大延长了。
C. 基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达，表达产物包含更多的抗原决定簇，可提高试剂盒的灵敏度，提高检出率。
D. 纯化难度大。基因工程抗原的纯化技术难度较大。
合成多肽抗原是根据蛋白质抗原分子的某一抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。合成肽抗原有以下特点： a.分子量太小;b.一般只含有一个抗原决定簇;c.纯度高;d.稳定性差。

【实验注意事项】

一、标本收集体积 100μl 。当天进行实验标本储存在4℃备用。标本2-8℃可以保存48小时；-20℃可以保存1个月，-70℃可以保存309个月。标本避免反复冻融。
二、血清标本采集避免溶血。红细胞溶解时会释放具有过氧化物酶活性物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。
三、标本宜在新鲜时代测。保存时间过长的样本可能发生聚合，ELISA实验中会使本底加深。
四、反复冻融会使蛋白效价降低，样本可以少量分装保存或者适当加入防腐剂。
五、如果您在购买我们公司试剂盒后操作中遇到任何特殊问题，敬请咨询我司。
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