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产地 | 美国/中国 |
品牌 | xuanya |
货号 | XY-SG-D-1338 |
用途 | 科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 |
【中文名称】鸭源性成分荧光PCR检测试剂盒(Duck)
【英文名称】Nucleic acid detection kit for duck derived ingredients (Duck) (PCR method)
【产品及特点】
鸭源性成分荧光PCR检测试剂盒(Duck)是基于荧光染料检测的即用型 PCR 试剂盒,可以对靶片段进行实时定量PCR 分析(quantitative PCR、qPCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料 DNAgreen 等所有实时定量 PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量 PCR 反应和 HRM 分析,具有广泛的用途。
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量 PCR 实验和 HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于 SYBR Green I 和 LC Green 染料的 qPCR mix 则不能同时用于上述两种实验。
2. 使用第三代饱和型荧光染料,信号强,不会抑制 PCR 反应。
3. 快捷,即用型的预配液使加样操作步骤大大简化,避免了交叉污染,降低实验误差。
4. 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能检测到浓度为 50 拷贝/mL 的靶分子。
鸭源性成分荧光PCR检测试剂盒(Duck)【规格及成分】
成分 | 100次热封袋包装 |
qPCR MagicMix,2× | 1 mL |
专一性引物对 | 200 μL |
阳性对照 | 50 μL |
超纯水 | 1 mL |
使用手册 | 1 份 |
鸭源性成分荧光PCR检测试剂盒(Duck)【运输及保存】
低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
【产品图片】
【自备试剂】
DNA 模板、引物、超纯水。
【使用方法】
1. 以 20 uL 的 qPCR 反应体系为例:在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:
反应体系成分 | 20 uL 体系 | 终浓度 |
qPCR MagicMix,2× | 10 uL | 1× |
自备引物一 a | x uL | 0.1-0.5 uM |
自备引物二 a | x uL | 0.1-0.5 uM |
自备模板 a | x uL | |
自备 ROXb | 2 uL | (可以不加) |
补超纯水到 | 20 uL |
放入荧光 PCR 仪中进行扩增, 并在退火或延长步骤中记录荧光信号。
注意:
a) 通常引物浓度以 0.2 μM 可得到较好结果,可以终浓度 0.1-1.0 μM 作为设定范围的参考;通常 DNA模板的量以10-100 ng基因组 DNA或1-10 ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定*的模板使用量。
b) ROX 校正染料:如果使用 ABI 公司的 7500,7700 和 7900 三种型号的荧光 PCR 仪器,则需用自备的 ROX 进行 Ct 值校正。对 ABI 7700 和 7900,ROX 的*浓度为 1×(即在每 20 uL 反应体系中加 2 uL 10×ROX)。对ABI 7500, ROX 的*浓度为 0.05-0.1×(每 20 uL 反应体系加 0.1-0.2uL 10×ROX;也可将 10×ROX 稀释到 1×,然后每个反应体系加入 1-2 uL1×ROX)。ROX 会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。
对于 iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000, RotorGene3000,RotorGene 6000 和 LightCycler 480 等型号的荧光PCR 仪器,ROX 不是必须的,但加入的话也不会影响整个 PCR 分析。
C:通用循环法:这种循环方法适用于几乎所有的荧光 PCR 仪,也适用于用快速循环法不能扩增的模版。
酶活化 | 温度 | 时间 | 循环数 |
酶活化 | 95℃ | 10 min | 1 |
变性 退火&延伸 | 95℃ 60℃ | 15 s 60 s | 35-40 |
3. 数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在没结合 DNA 时,*吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的*吸收光谱在 500nm,*发射光谱在530nm。
其他注意事项:
1. 如果使用 iCycler,可以不加入 FAM。
2. 如果使用Roche LightCycler的玻璃毛细管进行PCR,需加入终浓度为0.5mg/mL的自备 BSA。
鸭源性成分荧光PCR检测试剂盒(Duck)关联产品:
植物线粒体纯化试剂盒 ( 粗提 ) XY-TE-0214 5次
植物线粒体纯化试剂盒 ( 精提 ) XY-TE-0215 5次
超敏化学发光 (HRP) 检测试剂盒(ECL) XY-TE-0218 25mL
超敏化学发光 (HRP) 检测试剂盒(ECL) XY-TE-0219 250mL
植物叶绿体纯化试剂盒 XY-TE-0223 15 次
终点显色法内毒素定量试剂盒 XY-TE-0244 32 次
暗盒 (5×7 英寸 ) XY-TE-0273 1个
暗盒 (8×10 英寸 ) XY-TE-0274 1个
填入法 DNA 末端标记试剂盒 A XY-TE-0290 5次
填入法 DNA 末端标记试剂盒 B XY-TE-0291 5次
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C XY-TE-0292 5次
天净沙镍柱原位再生试剂盒 XY-TE-0350 20 次
血液线粒体和核 DNA 双提试剂盒 XY-TE-0351 25 次
增强型天狼猩红染色试剂盒 XY-TE-0393 100mL
茜素红 S 染色试剂盒 XY-TE-0394 100mL
超快核酸转膜试剂盒 XY-TE-0395 5次
天净沙非同位素探针杂交试剂盒 XY-TE-0397 5次
天净沙非同位素探针杂交试剂盒 XY-TE-0398 5次
柱式探针纯化试剂盒 XY-TE-0400 10 次
CCK-8 细胞增殖及毒性检测试剂盒 XY-TE-0403 5mL