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产地 | 美国/中国 |
品牌 | xuanya |
货号 | XY-SD-1341 |
用途 | 科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 |
【中文名称】猪圆环病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(PCV-U)
【英文名称】universal nucleic acid detection kit for porcine circovirus (PCV-U) (PCR- fluorescent probe method)
【产品及特点】
猪圆环病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(PCV-U)是基于荧光染料检测的即用型 PCR 试剂盒,可以对靶片段进行实时定量PCR 分析(quantitative PCR、qPCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料 DNAgreen 等所有实时定量 PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量 PCR 反应和 HRM 分析,具有广泛的用途。
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量 PCR 实验和 HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于 SYBR Green I 和 LC Green 染料的 qPCR mix 则不能同时用于上述两种实验。
2. 使用第三代饱和型荧光染料,信号强,不会抑制 PCR 反应。
3. 快捷,即用型的预配液使加样操作步骤大大简化,避免了交叉污染,降低实验误差。
4. 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能检测到浓度为 50 拷贝/mL 的靶分子。
猪圆环病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(PCV-U)【规格及成分】
成分 | 100次热封袋包装 |
qPCR MagicMix,2× | 1 mL |
专一性引物对 | 200 μL |
阳性对照 | 50 μL |
超纯水 | 1 mL |
使用手册 | 1 份 |
猪圆环病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(PCV-U)【运输及保存】
低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
【产品图片】
【自备试剂】
DNA 模板、引物、超纯水。
【使用方法】
1. 以 20 uL 的 qPCR 反应体系为例:在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:
反应体系成分 | 20 uL 体系 | 终浓度 |
qPCR MagicMix,2× | 10 uL | 1× |
自备引物一 a | x uL | 0.1-0.5 uM |
自备引物二 a | x uL | 0.1-0.5 uM |
自备模板 a | x uL | |
自备 ROXb | 2 uL | (可以不加) |
补超纯水到 | 20 uL |
放入荧光 PCR 仪中进行扩增, 并在退火或延长步骤中记录荧光信号。
猪圆环病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(PCV-U)注意:
a) 退火温度:建议采用两步法 PCR,退火温度 60℃进行反应。若提高反应特异性,可提高退火温度,以 60-64℃作为设定范围的参考。若因使用 Tm 值较低的引物等原 因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法 PCR 扩增,三步法的退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。延伸温度:延伸温度设为 72℃通常可以提高扩增效率。但是,对于 AT 含量大于 70%的扩增子来说,延伸温度设为 60℃为宜。
C:通用循环法:这种循环方法适用于几乎所有的荧光 PCR 仪,也适用于用快速循环法不能扩增的模版。
酶活化 | 温度 | 时间 | 循环数 |
酶活化 | 95℃ | 10 min | 1 |
变性 退火&延伸 | 95℃ 60℃ | 15 s 60 s | 35-40 |
3. 数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在没结合 DNA 时,*吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的*吸收光谱在 500nm,*发射光谱在530nm。
其他注意事项:
1. 如果使用 iCycler,可以不加入 FAM。
2. 如果使用Roche LightCycler的玻璃毛细管进行PCR,需加入终浓度为0.5mg/mL的自备 BSA。
猪圆环病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(PCV-U)关联产品:
脂蛋白纯化试剂盒 XY-TE-0772 50 次
植物线粒体总蛋白提取试剂盒 XY-TE-0773 50 次
植物叶绿体蛋白提取试剂盒 XY-TE-0774 50 次
石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒 XY-TE-0775 50 次
细胞核蛋白提取试剂盒 XY-TE-0777 50 次
动物线粒体总蛋白提取剂盒 XY-TE-0778 50 次
高效农杆菌感受态细胞制备试剂盒 XY-TE-0779 20 次
miRNA cDNA 第一链合成试剂盒 XY-TE-0794 25 次
两管式 RT-PCR 试剂盒 (AMV-Taq) XY-TE-0802 50 次
单酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (Tth) XY-TE-0803 50 次
免 RNA 提取 RT-PCR 试剂盒 XY-TE-0833 100 次
柱式病毒 RNA-DNA 双提试剂盒 XY-TE-0843 50 次
凝胶法 miRNA 分离试剂盒 XY-TE-0844 50 次
一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒 XY-TE-0846 50 次
一站式磁珠法真菌 mRNA 提取试剂盒 XY-TE-0847 50 次
免 DNA 提取 PCR 试剂盒 XY-TE-0854 100 次
即用型热启动 PCR 试剂盒 XY-TE-0855 1.5mL
DAB 法*杂交试剂盒 XY-TE-0870 5次
TMB 法*杂交试剂盒 XY-TE-0871 5次
cDNA 第二链合成试剂盒 XY-TE-0876 30 次