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| 产地 | 美国/中国 |
| 品牌 | xuanya |
| 货号 | XY-EP-R-1333 |
| 用途 | 科研 |
| 包装规格 | 50T |
| 纯度 | % |
| CAS编号 | |
| 是否进口 |
【中文名称】病毒荧光PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】Human virus fluorescence qualitative PCR Kit
病毒荧光PCR检测试剂盒说明书【规格及成分】
成分 | 100次热封袋包装 |
qPCR MagicMix，2× | 1 mL |
专一性引物对 | 200 μL |
阳性对照 | 50 μL |
超纯水 | 1 mL |
使用手册 | 1 份 |
病毒荧光PCR检测试剂盒说明书【运输及保存】
低温运输，-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
【产品图片】
【自备试剂】
DNA 模板、引物、超纯水。
【使用方法】
1. 以 20 uL 的 qPCR 反应体系为例：在一干净的 PCR 管中，加入下列成分：
反应体系成分 | 20 uL 体系 | 终浓度 |
qPCR MagicMix，2× | 10 uL | 1× |
自备引物一 a | x uL | 0.1-0.5 uM |
自备引物二 a | x uL | 0.1-0.5 uM |
自备模板 a | x uL | |
自备 ROXb | 2 uL | （可以不加） |
补超纯水到 | 20 uL |
放入荧光 PCR 仪中进行扩增, 并在退火或延长步骤中记录荧光信号。
病毒荧光PCR检测试剂盒说明书注意：
a) 退火温度：建议采用两步法 PCR，退火温度 60℃进行反应。若提高反应特异性，可提高退火温度，以 60-64℃作为设定范围的参考。若因使用 Tm 值较低的引物等原 因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法 PCR 扩增，三步法的退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。延伸温度：延伸温度设为 72℃通常可以提高扩增效率。但是，对于 AT 含量大于 70%的扩增子来说，延伸温度设为 60℃为宜。
C：通用循环法：这种循环方法适用于几乎所有的荧光 PCR 仪，也适用于用快速循环法不能扩增的模版。
酶活化 | 温度 | 时间 | 循环数 |
酶活化 | 95℃ | 10 min | 1 |
变性 退火&延伸 | 95℃ 60℃ | 15 s 60 s | 35-40 |
3. 数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在没结合 DNA 时，*吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的*吸收光谱在 500nm，*发射光谱在530nm。
其他注意事项：
1. 如果使用 iCycler，可以不加入 FAM。
2. 如果使用Roche LightCycler的玻璃毛细管进行PCR，需加入终浓度为0.5mg/mL的自备 BSA。
病毒荧光PCR检测试剂盒说明书关联产品：
PCR 法 DNA 探针*标记试剂盒 XY-TE-1993 5次
即用型长片段 PCR 试剂盒 XY-TE-2004 20 次
即用型高保真 PCR 试剂盒 XY-TE-2009 1.5mL
即用型高保真 PCR 试剂盒 XY-TE-2010 9mL
即用型 PCR 试剂盒 3.0 XY-TE-2016 1 mL
即用型 PCR 试剂盒 3.0 XY-TE-2017 9 mL
双酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq) XY-TE-2036 50 次
Benzonase 核酸酶 XY-TE-0140 500U
天净沙核酸浓缩剂 XY-TE-0195 30mL
S1 核酸酶 XY-TE-0236 5000U
绿豆核酸酶 XY-TE-0237 1000U
BAL31 核酸酶 XY-TE-0238 50U
核酸外切酶 I XY-TE-0239 750U
微球菌核酸酶 XY-TE-0241 5000U
核糖核酸酶 H XY-TE-0242 600U
核酸外切酶 III XY-TE-0246 2500U
绿如兰核酸染料 ( 可见光型 ) XY-TE-0387 10mL
超快核酸转膜试剂盒 XY-TE-0395 5次
核酸外切酶 T XY-TE-0646 250U
Lambda 核酸外切酶 XY-TE-0647 1000U
