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产地 | 美国/中国 |
品牌 | xuanya |
货号 | XY-DT-D-1325 |
用途 | 科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 |
【中文名称】河弧菌荧光PCR检测试剂盒(VF)
【英文名称】Nucleic acid amplification test kit for Vibrio vulnificus (VF) (RT-PCR method)
【产品及特点】
河弧菌荧光PCR检测试剂盒(VF)是基于荧光染料检测的即用型 PCR 试剂盒,可以对靶片段进行实时定量PCR 分析(quantitative PCR、qPCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料 DNAgreen 等所有实时定量 PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量 PCR 反应和 HRM 分析,具有广泛的用途。
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量 PCR 实验和 HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于 SYBR Green I 和 LC Green 染料的 qPCR mix 则不能同时用于上述两种实验。
2. 使用第三代饱和型荧光染料,信号强,不会抑制 PCR 反应。
3. 快捷,即用型的预配液使加样操作步骤大大简化,避免了交叉污染,降低实验误差。
4. 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能检测到浓度为 50 拷贝/mL 的靶分子。
河弧菌荧光PCR检测试剂盒(VF)【规格及成分】
成分 | 100次热封袋包装 |
qPCR MagicMix,2× | 1 mL |
专一性引物对 | 200 μL |
阳性对照 | 50 μL |
超纯水 | 1 mL |
使用手册 | 1 份 |
河弧菌荧光PCR检测试剂盒(VF)【运输及保存】
低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
【产品图片】
【自备试剂】
DNA 模板、引物、超纯水。
【使用方法】
1. 以 20 uL 的 qPCR 反应体系为例:在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:
反应体系成分 | 20 uL 体系 | 终浓度 |
qPCR MagicMix,2× | 10 uL | 1× |
自备引物一 a | x uL | 0.1-0.5 uM |
自备引物二 a | x uL | 0.1-0.5 uM |
自备模板 a | x uL | |
自备 ROXb | 2 uL | (可以不加) |
补超纯水到 | 20 uL |
放入荧光 PCR 仪中进行扩增, 并在退火或延长步骤中记录荧光信号。
注意:
a) 通常引物浓度以 0.2 μM 可得到较好结果,可以终浓度 0.1-1.0 μM 作为设定范围的参考;通常 DNA模板的量以10-100 ng基因组 DNA或1-10 ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定*的模板使用量。
b) ROX 校正染料:如果使用 ABI 公司的 7500,7700 和 7900 三种型号的荧光 PCR 仪器,则需用自备的 ROX 进行 Ct 值校正。对 ABI 7700 和 7900,ROX 的*浓度为 1×(即在每 20 uL 反应体系中加 2 uL 10×ROX)。对ABI 7500, ROX 的*浓度为 0.05-0.1×(每 20 uL 反应体系加 0.1-0.2uL 10×ROX;也可将 10×ROX 稀释到 1×,然后每个反应体系加入 1-2 uL1×ROX)。ROX 会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。
对于 iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000, RotorGene3000,RotorGene 6000 和 LightCycler 480 等型号的荧光PCR 仪器,ROX 不是必须的,但加入的话也不会影响整个 PCR 分析。
河弧菌荧光PCR检测试剂盒(VF)关联产品:
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