【产品名称】

通用名称：肺炎衣原体(CP)荧光PCR检测试剂盒

Name ：Chlamydia pneumoniae (CP) nucleic acid detection kit (PCR- fluorescence probe method)

【包装规格】48T/盒

肺炎衣原体(CP)荧光PCR检测试剂盒【预期用途】

本试剂盒适用于检测动物腺、肝、脾、肺组织及人痰、血液等标本中分离出的指标，用于指标的定量检测辅助诊断。

【检验原理】

本试剂盒采对指标基因设计特异性的引物和探针，用荧光 PCR 技术对指标的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

【试剂组成】

名 称	规 格
核酸提取液	1.5mL×2 管
酶液	50μL×1 管
反应液	1.0mL×1 管
阳性质控品	50μL×1 管
阴性质控品	250μL×1 管

说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。

【注意事项】

所有操作严格按照说明书进行；

试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；

反应液应避光保存；

反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

使用一次性吸头、一次性手套和各区与用工作服；

样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

肺炎衣原体(CP)荧光PCR检测试剂盒【使用方法】

样品处理（样本处理区）

样本前处理

组织样品：每份组织分别从 3 个不同的位置称取样品约 1g，手术剪剪碎混匀后取0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；棉拭子取 100μL 进行提取。

【标本采集】

无菌注射器抽取血液 3~5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管；有神经系统症状的，动物戒病人取脑脊液进行检测；疑似污染的食物取 1g 进行检测

【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但丌能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

1.1样本前处理

固体样本：手术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；液体样本：直接取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；

脑脊液直接取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；

血液样本：取抗凝血下层血细胞 50μL，加入 100μL 双蒸水吹匀。

DNA 提取

对上述处理好的标本加入 50μL 核酸提取液，100℃恒温处理 10min，13,000rpm 离心 5min，取上清液转移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；

DNA 的提取也可以采用上海烜雅生物科技有限公司生产的 DNA 提取试剂盒（离心柱提取法），请严格按照试剂盒说明书进行操作。

试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；样品每满 7 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：

试剂	反应液	酶液
用量（样本数为 N）	20μL	1μL

将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，21uL/管。

加样（样本处理区）

将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。

PCR 扩增（核酸扩增区）

将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；

设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL；

荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）

NONE，请勿选择 ROX 参比荧光。

推荐循环参数设置：

步骤	循环数	温度	时间	收集荧光信号
1	1 cycle	95℃	10min	否
2	40 cycles	94℃	15sec	否
		55℃	30sec	是

结果分析判定

结果分析条件设定

设置 Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节)，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。

结果判断

阳性：检测通道 Ct 值≤35.0，且曲线有明显的指数增长曲线。

可疑：检测通道 Ct 值>35.0，且出现明显扩增曲线的样本建议重复试验，重复试验结果出现 Ct 值≤35.0 和明显扩增曲线者为阳性，否则为阴性。

阴性：样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。

检测方法的局限性

样本检测结果不样本收集、处理、运送以及保存质量有关；

样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；

阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；

病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；

不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；

试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果。

质控标准

阴性质控品：无明显扩增曲线或无 Ct 值显示；

阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。

肺炎衣原体(CP)荧光PCR检测试剂盒【储存条件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。

【适用仪器】

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

【标本采集】

患病动物：腺、肝、脾、肺组织、粪便、血液人：痰；尿液、血液

【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

【注意事项】

所有操作严格按照说明书进行；

试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；

反应液应避光保存；

反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

使用一次性吸头、一次性手套和各区与用工作服；

样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

【产品图片】

【参考文献】

国家质量监督检验检疫总局.SN/T

【生产企业】

企业名称：上海烜雅生物科技有限公司

生产地址：金海公路3265号14幢11546室

上海烜雅生物科技有限公司生产的肺炎衣原体(CP)荧光PCR检测试剂盒质量高，价格低，售后有保证。为您的实验保驾护航。

请直接向我司客服索取说明书

本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断。

肺炎衣原体(CP)荧光PCR检测试剂盒 产品：

水产    XY-AD-R-1111    对虾黄头病病毒(YHV)核-酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)

水产    XY-AD-R-1112 病毒性出血性败血症病毒(VHSV)核-酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)

水产    XY-AD-R-1113    草鱼出血热病毒(GCHV)核-酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)

水产    XY-AD-R-1114    对虾传染性肌肉坏死病毒(IMNV)核-酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)

水产    XY-AD-R-1115 传染性造血器官坏死病毒(IHNV)核-酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)

水产    XY-AD-R-1116    鱼类神经坏死病毒（VNN）核-酸检测试剂盒(RT-PCR 荧光探针法)

水产    XY-AD-R-1117    罗湖病毒（TiLV）核-酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)

水产    XY-AD-R-1118    水产荧光PCR试剂盒

细菌类(人相关）    XY-DT-D-1119    C型产气荚膜杆菌(CP-C)核-酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

细菌类(人相关）    XY-DT-D-1120    河弧菌(VF)核-酸扩增检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

大鼠P53(P53)ELISA试剂盒

大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒

大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒

大鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒

大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒

大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒

大鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒

大鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒

大鼠热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒

大鼠热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒

大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒

大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒

大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒

大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒

大鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒

大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒

大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒

大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒

大鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒

大鼠卵巢癌标志物CA125ELISA试剂盒

大鼠乳腺癌标志物-CA153ELISA试剂盒

大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒

大鼠血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒

大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA试剂盒

大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒

大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒

大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒

大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒

大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒

大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA试剂盒

大鼠水通道蛋白2(AQP-2)   ELISA试剂盒

大鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒

大鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒

大鼠绒毛膜促性-腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒

大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒

大鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒

大鼠脱氢表雄酮(DHEA)ELISA试剂盒

大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒

大鼠妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒

大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒

大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒

大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒

大鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒

大鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒

大鼠生长抑素(SS)ELISA试剂盒

大鼠血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒

大鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒

大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒

大鼠结蛋白(Des)ELISA试剂盒

大鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA试剂盒

大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒

大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒

大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒

大鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒

大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒

大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒

大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒

大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒

大鼠血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒

大鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒

大鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒

大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒

大鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒

大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒

大鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA试剂盒

大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA试剂盒

大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒

大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒

大鼠胰高血糖素样肽1(Glp-1)ELISA试剂盒

大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒

大鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒

大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒

大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒

大鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒

大鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒

大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒

大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒

大鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒

大鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒

大鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒

大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒

大鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒

大鼠S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒

大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒

大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒

大鼠白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒

大鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒

大鼠血栓素b2(TXB2)ELISA试剂盒

大鼠乙酰胆碱(Ach)ELISA试剂盒

大鼠促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒

大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒

大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒

大鼠促性-腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒

大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒