【产品名称】

商品名称：脑膜炎奈瑟菌W135群(NM-W135)荧光PCR检测试剂盒

Name ：Neisseria meningitidis W135 group (NM-W135) nucleic acid detection kit (PCR- fluorescence probe method)

【包装规格】48T/盒

脑膜炎奈瑟菌W135群(NM-W135)荧光PCR检测试剂盒【预期用途】

本试剂盒适用于检测标本中指标的定量检测，辅助诊断。

【试剂组成】

详见说明书

注：

1） 不同批号试剂不能混用。

2） 试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。

【检验原理】

本试剂盒对指标特异核酸序列设计引物和探针，用一步法荧光RT-PCR 技术对指标 RNA 进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

脑膜炎奈瑟菌W135群(NM-W135)荧光PCR检测试剂盒【使用方法】

1. 样品处理（样本处理区）

1.1 样本前处理

【标本采集】

咽拭子：应使用与用采样拭子，适度拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，应避免触及舌 部 ； 迅 速 将 拭 子 放 入 标 本 采 集 管 中 ， 旋 紧 管 盖 并 密 封 ， 以 防 干 燥 。

全血：疑似感染病人的静脉血 2mL 至 EDTA-2Na 抗凝管，8000rpm 离心 2min，取适量上清液于 1.5mL 灭菌离心管中。痰： 以清晨的 口痰为宜。先用清水漱口，嘱患者用力咳出深部的痰于无菌样本保存管，密封，即可送检。

【标本采集】

病死或扑杀禽，取喉气管、脑、胸肌、心肌和肺等组织；待检活禽，用棉拭子取呼吸道分泌物或排泄物，置于 1mL 50%甘油生理盐水中。

【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但丌能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

1.2DNA 提取

1) 对上述处理好的标本加入 50μL 核酸提取液，100℃恒温处理 10min，13,000rpm 离心 5min，取上清液转移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；

2) DNA 的提取也可以采用上海烜雅生物科技有限公司生产的 DNA 提取试剂盒（离心柱提取法），请严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.2 RNA 提取

推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的RNA 提取试剂盒（离心柱提取法），请按照试剂盒说明书进行操作。

2. 试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；样品每满 7 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：

将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，21uL/管。

3. 加样（样本处理区）

将步骤 1 提取的 RNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。

4. PCR 扩增（核酸扩增区）

4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；

4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL；荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。

4.3 推荐循环参数设置：

5. 结果分析判定

5.1 结果分析条件设定

设置 Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、

stop 值(一般可在 5~20 范围内调节)，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。

5.2 结果判断

阳性：检测通道 Ct 值≤35.0，且有明显的扩增曲线。

可疑：检测通道 Ct 值>35.0，且出现明显曲线的样本建议重复试验，重复试验结果如果同样出现 Ct 值≤35.0 和明显扩增曲线则为阳性，否则为阴性。

阴性：样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。

6. 质控标准

阴性质控品：无明显扩增曲线且无 Ct 值显示；

阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。

7. 检测方法的局限性

① 样本检测结果不样本收集、处理、运送以及保存质量有关；

②样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；

③阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；

④病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；

⑤不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；

⑥试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；

脑膜炎奈瑟菌W135群(NM-W135)荧光PCR检测试剂盒【储存条件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。

【适用仪器】

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

【标本采集】

病死或扑杀动物，取水泡皮及水泡液；待检活动物，取 O/P 液 2~3mL。

【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

【产品图片】

【生产企业】

企业名称：上海烜雅生物科技有限公司

生产地址：金海公路3265号14幢11546室

上海烜雅生物科技有限公司生产的脑膜炎奈瑟菌W135群(NM-W135)荧光PCR检测试剂盒质量高，价格低，售后有保证。为您的实验保驾护航。

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本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断。

脑膜炎奈瑟菌W135群(NM-W135)荧光PCR检测试剂盒新产品：

1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 盒装已灭菌带芯 )    XY-TE-1277    100 支

ATP 检测试剂盒    XY-TE-1280    200 次

ATP 酶测试盒 ( 组织及细胞膜不需高速离心 )    XY-TE-1281    50 T

ATP 酶测试盒 ( 组织及细胞膜需高速离心 )    XY-TE-1282    50 T

CuZn/Mn-SOD 活性检测试剂盒 (WST 法 )    XY-TE-1284    100 次

GSH—PX 测试盒    XY-TE-1285    50 T

GSH—ST 测试盒    XY-TE-1286    100 T

GSH 和 GSSG 试剂盒    XY-TE-1287    共 100 次

GSH 试剂盒 ( 谷胱甘肽测试盒 )( 比色法 )    XY-TE-1288    50 T

H5N1 神经氨酸酶抑制剂鉴定试剂盒    XY-TE-1289    100 次

NF-κB 激活－核转运检测试剂盒    XY-TE-1290    50 次

ROS 活性氧检测试剂盒    XY-TE-1291    100 T

丙二醛测试盒 / 脂质过氧化物测试盒    XY-TE-1292    50 T

超微量 ATP 酶测试盒 (Na+K+、Ca2+Mg2+ATPase)    XY-TE-1293    25 T

超微量 ATP 酶测试盒 ( 测 Ca2+ATPase)    XY-TE-1294    25 T

超微量 ATP 酶测试盒 ( 测 Ca2+Mg2+ATPase)    XY-TE-1295    25 T

超微量 ATP 酶测试盒 ( 测 Na+K+ATPase)    XY-TE-1296    25 T

超微量 ATP 酶测试盒 ( 可测总 ATPase)    XY-TE-1297    25 T

超氧化物试剂盒    XY-TE-1298    100 次

超氧化物歧化酶测试盒    XY-TE-1299    48 T

人凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA试剂盒

人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA试剂盒

人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒

人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒

人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒

人抗凝血酶受体(ATR)ELISA试剂盒

人凝血酶受体(TR)ELISA试剂盒

人第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒

人血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒

人主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA试剂盒

人抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒

人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒

人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒

人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA试剂盒

人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA试剂盒

人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒

人载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒

人白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒

人免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒

人免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒

人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒

人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒

人血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒

人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒

人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒

人血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒

人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒

人组织因子(TF)ELISA试剂盒

人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒

人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒

人淋巴细胞功能相关抗原2(LFA-2/CD2)ELISA试剂盒

人白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒

人D二聚体(D2D)ELISA试剂盒

人免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒

人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA试剂盒

人白细胞调节素(LR)ELISA试剂盒

人血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒

人白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒

人Salusin-α ELISA试剂盒

人胰岛素受体底物2(IRS-2)ELISA试剂盒

人转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA试剂盒

人晚期氧化蛋白产物(AOPP)ELISA试剂盒

人胰岛淀粉样多肽(IAPP)ELISA试剂盒

人糖化蛋白(GSP)ELISA试剂盒

人糖化白蛋白(GA)ELISA试剂盒

人甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒

人晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒

人C多肽(CP) ELISA试剂盒