上海烜雅生物科技有限公司
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新孢子虫(Ne)荧光PCR检测试剂盒
  • 品牌:xuanya
  • 产地:美国/中国
  • 货号:XY-RD-D-1078
  • 价格: ¥100/盒
  • 发布日期: 2019-12-04
  • 更新日期: 2025-08-13
产品详请
产地 美国/中国
品牌 xuanya
货号 XY-RD-D-1078
用途 科研
包装规格 48T
纯度 %
CAS编号
是否进口

【产品名称】

通用名称:新孢子虫(Ne)荧光PCR检测试剂盒

【包装规格】48T/盒

Name :New nucleic acid detection kit for new sporozoite (Ne) (PCR- fluorescent probe)

新孢子虫(Ne)荧光PCR检测试剂盒【预期用途】试剂配制(试剂准备区)

根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照;样品每满 7 份,多配制 1 份),每测试反应体系配制如下表:

试剂

反应液

酶液

用量(样本数为 N)

20μL

1μL

将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中,21uL/管。

加样(样本处理区)

将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。

PCR 扩增(核酸扩增区)

将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内;

设置好通道、样品信息,反应体系设置为 25μL;

荧光通道选择: 检测通道(Reporter Dye)FAM, 淬灭通道(Quencher Dye)

NONE,请勿选择 ROX 参比荧光。

推荐循环参数设置:

步骤

循环数

温度

时间

收集荧光信号

1

1 cycle

95℃

10min

2

40 cycles

94℃

15sec

55℃

30sec

结果分析判定

结果分析条件设定

设置 Baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。

结果判断

阳性:检测通道 Ct 值≤35.0,且曲线有明显的指数增长曲线。

可疑:检测通道 Ct 值>35.0,且出现明显扩增曲线的样本建议重复试验,重复试验结果出现 Ct 值≤35.0 和明显扩增曲线者为阳性,否则为阴性。

阴性:样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。

检测方法的局限性

样本检测结果不样本收集、处理、运送以及保存质量有关;

样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;

阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;

病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;

不同的提取方法存在提取效率差异,会导致假阴性结果;

试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果。

质控标准

阴性质控品:无明显扩增曲线或无 Ct 值显示;

阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。

【参考文献】

国家质量监督检验检疫总局.SN/T 1280-2003 国境口岸检验规程[S].北京:科学出版社, 2003.

张志凯, 海荣, 蔡虹, 等. 耶尔森菌的多重 PCR 检测方法[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2007.

吉林省质量技术监督局. DB22/T 2081-2014 耶尔森菌核酸的测定-荧光PCR 方法[S].

 

新孢子虫(Ne)荧光PCR检测试剂盒【储存条件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次,有效期 12 个月。

【适用仪器】

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

【标本采集】

患病动物:腺、肝、脾、肺组织、粪便、血液人:痰;尿液、血液

【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。

【产品图片】

 

 

【生产企业】

企业名称:上海烜雅生物科技有限公司

生产地址:金海公路3265号14幢11546室 

 

上海烜雅生物科技有限公司生产的新孢子虫(Ne)荧光PCR检测试剂盒供应质量高,价格低,售后有保证。为您的实验保驾护航。

  

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本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断。

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