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| 产地 | 美国/中国 |
| 品牌 | xuanya |
| 货号 | XY-SD-R-1063 |
| 用途 | 科研 |
| 包装规格 | 48T |
| 纯度 | % |
| CAS编号 | |
| 是否进口 |
【产品名称】
通用名称：口蹄疫病毒O型(FMDV-O)荧光PCR检测试剂盒
Name ：Real-Time PCR Method
【包装规格】48T/盒
口蹄疫病毒O型(FMDV-O)荧光PCR检测试剂盒【预期用途】
本试剂盒适用于检测动物腺、肝、脾、肺组织及人痰、血液等标本中分离出的指标，用于指标的定量检测辅助诊断。
【检验原理】
本试剂盒采对指标基因设计特异性的引物和探针，用荧光 PCR 技术对指标的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
【试剂组成】
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名 称 |
规 格 |
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核酸提取液 |
1.5mL×2 管 |
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酶液 |
50μL×1 管 |
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反应液 |
1.0mL×1 管 |
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阳性质控品 |
50μL×1 管 |
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阴性质控品 |
250μL×1 管 |
说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【注意事项】
所有操作严格按照说明书进行；
试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
反应液应避光保存；
反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
使用一次性吸头、一次性手套和各区与用工作服；
样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
1.1样本前处理
固体样本：手术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；液体样本：直接取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；
脑脊液直接取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；
血液样本：取抗凝血下层血细胞 50μL，加入 100μL 双蒸水吹匀。
DNA 提取
对上述处理好的标本加入 50μL 核酸提取液，100℃恒温处理 10min，13,000rpm 离心 5min，取上清液转移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；
DNA 的提取也可以采用上海烜雅生物科技有限公司生产的 DNA 提取试剂盒（离心柱提取法），请严格按照试剂盒说明书进行操作。
试剂配制（试剂准备区）
根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；样品每满 7 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：
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试剂 |
反应液 |
酶液 |
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用量（样本数为 N） |
20μL |
1μL |
将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，21uL/管。
加样（样本处理区）
将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。
PCR 扩增（核酸扩增区）
将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；
设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL；
荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）
NONE，请勿选择 ROX 参比荧光。
推荐循环参数设置：
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步骤 |
循环数 |
温度 |
时间 |
收集荧光信号 |
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1 |
1 cycle |
95℃ |
10min |
否 |
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2 |
40 cycles |
94℃ |
15sec |
否 |
|
55℃ |
30sec |
是 |
结果分析判定
结果分析条件设定
设置 Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节)，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。
结果判断
阳性：检测通道 Ct 值≤35.0，且曲线有明显的指数增长曲线。
可疑：检测通道 Ct 值>35.0，且出现明显扩增曲线的样本建议重复试验，重复试验结果出现 Ct 值≤35.0 和明显扩增曲线者为阳性，否则为阴性。
阴性：样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。
检测方法的局限性
样本检测结果不样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果。
质控标准
阴性质控品：无明显扩增曲线或无 Ct 值显示；
阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。
【注意事项】
所有操作严格按照说明书进行；
试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
反应液应避光保存；
反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
使用一次性吸头、一次性手套和各区与用工作服；
样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
【产品图片】
上海烜雅生物科技有限公司生产的口蹄疫病毒O型(FMDV-O)荧光PCR检测试剂盒供应质量高，价格低，售后有保证。为您的实验保驾护航。
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本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断。
口蹄疫病毒O型(FMDV-O)荧光PCR检测试剂盒
人ω干扰素(IFN-ω)ELISA试剂盒
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人可溶性CD38(sCD38)ELISA试剂盒
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| 小鼠雌三醇(E3)ELISA试剂盒 |
| 小鼠雄烯二酮(ASD)ELISA试剂盒 |
| 小鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒 |
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| 小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 |
| 小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒 |
| 小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒 |
| 小鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒 |
| 小鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 |
| 小鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒 |
| 小鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒 |
| 小鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒 |
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| 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒 |
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| 小鼠p53(p53)ELISA试剂盒 |
| 小鼠环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒 |
| 小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒 |
| 小鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 |
| 小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 |
| 小鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒 |
| 小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒 |
| 小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒 |
| 小鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒 |
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| 小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)ELISA试剂盒 |
| 小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒 |
| 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒 |
| 小鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒 |
